第十七次免疫组化质控活动存在的问题分析

单位编号:4
得分:Villin 10分
问题:信号弱、着色不均匀。
原因:由于所用一抗孵育是4℃过夜,有可能是温度过低,抗原抗体反应减缓。另外,pH6.0修复液的修复能力较弱,特别是微波修复而不是高压修复时。还有,SP方法的敏感性较弱。这三方面的因素聚在一起,可能是造成信号弱、着色不均匀原因。因此,
建议:一抗常温1小时;EDTA或EGTA pH8.0-9.0修复液;SP改为Polymer(如EliVision,MaxiVision)。

单位编号:12
得分:Villin 10分
问题:信号太弱。
原因:一抗和检测系统不是同一家公司的产品,有可能不一定完美匹配,有的抗体可能匹配很好但有的匹配不好。另外,一抗的浓度、有效性(如使用、保存是否规范等可能造成抗体效力下降)、一、二抗的孵育温度和时间也可能影响最终染色结果。你们其余三个抗体染色不错,因此,对抗体也要采取个体化对待,不一定同一种条件下每种抗体都能染出最佳效果。
建议:最好用同一家公司试剂,并摸索Villin的染色条件。

单位编号:23
得分:PSA 8分
问题:信号弱、背景深、过染,切片中4个点全部着色。
原因:这种情况的发生有几种可能:一抗浓度过高、孵育温度过高、时间过长、切片变干、切片重复第二次染色、一抗过期等。
建议:用当时同样的一抗重复染色本科室的前列腺组织,看看结果如何。如不好,应该是一抗出了问题;如果结果好,就应该仔细回顾和分析质控时每一个步骤是否出了问题,并参考上面问题中提到的几种可能性。

单位编号:30
得分:Villin 9分
问题:信号弱、背景深、着色不均匀。
原因:这种情况可能见于抗体孵育时组织变干所致,也可能一抗孵育时温度太低(虽然冰箱的冷藏一般都认为是4℃,其实并不完全恒定,可测测),如果再加上切片上水未甩干、抗体购置时间很久等细小因素,可能最终影响到染色结果。
建议:测冰箱温度、用同样方法染自己实验室的结肠组织看看。

单位编号:31
得分:TG 12分、Villin 12分
问题:TG信号弱,信号少。Villin的信号弱。
原因:这两个抗体的染色都太弱,很可能与修复有关。
建议:调试染色机的修复时间,摸索这两个抗体的最佳修复时间。

单位编号:36
得分:PSA 11分
问题:信号弱
原因:从注册表中没有发现染色方法和程序有何不妥。可能的因素:1、抗体效力下降(如有效期过了、保存不规范等);2、染色过程中切片上水未甩干。
建议:用自己实验室的前列腺组织及同样的方法和条件染色看看,以判断是试剂的问题还是染色过程出了问题。

单位编号:52
得分:PSA 10分
问题:信号弱、着色不均
原因:注册填表中看,你们没有对PSA进行修复,这可能是主要的原因。
建议:用EDTA或EGTA pH8.0-9.0修复液,微波或煮沸20分钟修复,或高压喷气持续2分钟。

单位编号:57
得分:Villin 10分
问题:信号弱、苏木素着色太深。
原因:微波修复10分钟太短,修复不足。阳性信号弱,苏木素着色又太深,更显阳性信号弱。
建议:修复时间延长到20分钟;苏木素染色后进行适当分化(过酸或水冲)。

单位编号:58
得分:HepPar-1 9分
问题:背景深、过染
原因:根据注册表,染色方法和程序没有看出问题。由于不熟悉上海杰洁公司产品质量,这是一个不确定的因素。
建议:用上海杰洁的HepPar-1与国内知名公司试剂(如迈新、DAKO等)对比染色,以便排除试剂因素的影响。

单位编号:60
得分:TG 11分、Villin 11分
问题:TG信号弱、信号少、苏木素着色深、红细胞着色; Villin信号弱、着色不均匀。
原因:TG未修复可能是信号弱少的原因。Villin染色时二抗98℃孵育,不知是这笔误还是真实,如果是后者,应该是染色不佳的原因之一。
建议:TG染色时,用EDTA或EGTA pH8.0-9.0修复液,微波或煮沸20分钟修复,或高压喷气持续2分钟。Villin染色时二抗常温孵育。

单位编号:61
得分:Villin 5分
问题:无信号
原因:可能的原因:1、一抗出问题;2、染色机程序和条件不适当。
建议:1、用手工染色测试一抗是否有效;2、调试染色机到最佳条件。

单位编号:70
得分:HepPar-1 6分
问题:信号弱、着色不均匀
原因:可能染色机染色程序和条件不适当。
建议:调试染色机到最佳条件。

单位编号:76
得分:TG 11分、Villin 11分
问题:TG无信号、背景深。Villin信号太弱
原因:其实你们的4个抗体染色都不太理想,因此,可能会有一个共同的原因存在。从你们的注册表看见一抗是在37℃30分钟孵育后再4℃过夜。这是一种未见过的一抗孵育方法:“先热后冷”。或许正是这种方法产生了你们的染色结果。
建议:用目前病理界流行的或公认的方法染色试试,并与你们的方法进行对比,看看“先热后冷”方法是否有效或更佳。

单位编号:77
得分:TG 11分
问题:信号少
原因:染色方法和程序没有发现问题。可能是克隆号(2H11)的原因。而其他公司的克隆号是:TGB04+TGB05;EP250;2H11/6E1。
建议:换克隆号试试。

单位编号:82
得分:TG 12分
问题:背景深、信号少
原因:一抗和检测系统分别选用了不同公司的试剂,有可能不完全匹配。信号少也许与克隆号有关,你们没有提供一抗的克隆号,这是一个尚待澄清的可疑因素。
建议:1、最好选用同一家公司试剂。2、查询克隆号,如果是2H11,提示着色点数较少。

单位编号:83
得分:PSA 7分
问题:信号太弱
原因:注册填表中看,你们没有对PSA进行修复,这可能是主要的原因。
建议:用EDTA或EGTA pH8.0-9.0修复液,微波或煮沸20分钟修复,或高压喷气持续2分钟。

单位编号:87
得分:PSA 12分
问题:信号弱、着色不均匀
原因:注册填表中看,你们没有对PSA进行修复,这可能是主要的原因。
建议:用EDTA或EGTA pH8.0-9.0修复液,微波或煮沸20分钟修复,或高压喷气持续2分钟。

单位编号:89
得分:PSA 10分
问题:背景深、过染、交叉着色(结肠上皮也着色了)
原因:注册填表中看,染色方法没有明显问题;不知是否与一抗有关。
建议:对比你们现用上海长岛一抗与DAKO或迈新的一抗染色情况。

单位编号:90
得分:PSA 7分
问题:信号太弱,几乎无色
原因:注册填表中看,你们没有对PSA进行修复,这可能是主要的原因。
建议:用EDTA或EGTA pH8.0-9.0修复液,微波或煮沸20分钟修复,或高压喷气持续2分钟。

单位编号:91
得分:PSA 12分
问题:信号弱、着色不均匀、红细胞着色
原因:注册填表中看,你们没有对PSA进行修复,这可能是主要的原因。
建议:用EDTA或EGTA pH8.0-9.0修复液,微波或煮沸20分钟修复,或高压喷气持续2分钟。

单位编号:93
得分:PSA 12分
问题:信号弱、着色不均匀
原因:从注册表中看,一抗37℃30分钟,这似乎时间短了点。“微波修复喷气后2分钟”,难以理解。
建议:延长一抗时间到60分钟;查证是否为高压修复喷气后2分钟。

单位编号:95
得分:0分
问题:无切片
原因:未寄回
建议:寄回切片

单位编号:96
得分:TG 9分
问题:信号弱、信号少
原因:注册填表中看,你们没有对TG进行修复,这可能是主要的原因。
建议:用EDTA或EGTA pH8.0-9.0修复液,微波或煮沸20分钟修复,或高压喷气持续2分钟。

单位编号:100
得分:Villin 12分
问题:信号太弱
原因:从注册表中你们的染色方法和程序没有问题。可能是操作过程中一些细节累加的结果,比如,加抗体前切片上的水没有甩干、加的抗体少了一点点、DAB显色时间短了一点等。
建议:用自己实验室的结肠组织再做一遍,注意细节,延长DAB显色时间至5分钟,看看结果是否会改善。

单位编号:111
得分:TG 11分
问题:信号弱
原因:一抗和检测系统不是同一个厂家,二者可能不一定完全匹配。机器染色的条件可能没有调整到TG抗体的最佳状态。
建议:用同一家公司产品;将机器染色调试到理想状态。

单位编号:115
得分:Villin 10分
问题:信号太弱、着色不均匀
原因:机器染色的条件可能没有调整到Villin抗体的最佳状态。
建议:将机器染色调试到理想状态。

单位编号:116
得分:PSA 10分;Villin 8分
问题:PSA信号微弱,Villin 无信号
原因:一抗37℃120分钟孵育时间太长。另外,一抗的效力是否足够也是需要确认的因素。
建议:用两家不同公司的抗体比较,看看现在的一抗是否有效。一抗室温60分钟即可。

单位编号:120
得分:HepPar-1 无分;PSA 5分
问题:Hep Par-1飞片。PSA 无信号
原因:飞片不是你们的错。这算没做。PAS无信号可能是机器染色的条件和程序欠适合。
建议:将机器染色条件和程序调试到最佳状态。

单位编号:137
得分:Villin 6分
问题:信号太弱、着色不均匀
原因:从注册表看,除了微波修复120℃20分钟,不能理解外,其余未发现异常。
建议:查看一抗有效期,如无问题,用自己实验室的结肠组织再做一遍,看看是否成功。

单位编号:143
得分:PSA 12分
问题:信号太弱、着色不均匀
原因:注册填表中看,你们没有对PSA进行修复,这可能是主要的原因。
建议:用EDTA或EGTA pH8.0-9.0修复液,微波或煮沸20分钟修复,或高压喷气持续2分钟。

单位编号:145
得分:Villin 11分
问题:信号太弱、着色不均匀
原因:可能的原因:1、机器未调试好;2、一抗效果不理想
建议:1、用两家不同公司的抗体比较,看看现在的一抗是否有效。2、将机器调试到染色的理想状态。

单位编号:146
得分:Villin 12分 改为13分
问题:信号弱,但纹状缘着色
原因:
建议:

单位编号:147
得分:Villin 12分 改为 13分
问题:信号弱,但纹状缘着色
原因:
建议:

单位编号:151
得分:Villin 10分 改为13分
问题:信号弱,但纹状缘着色
原因:
建议:

单位编号:155
得分:Villin 6分
问题:信号太弱
原因:一抗和检测系统不是同一个厂家,二者可能不一定完全匹配。一抗孵育25℃120分钟可能太长了。
建议:用同一家公司试剂。一抗孵育时间降到60分钟。

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